色譜柱的使用你學(xué)會(huì)了嗎,天恒儀器一分鐘帶你深入解析「廠家須知」
色譜柱的使用你學(xué)會(huì)了嗎?色譜柱在我們實(shí)驗(yàn)做檢測(cè)時(shí)是經(jīng)常會(huì)用到的產(chǎn)品,它的作用不容小覷,正確的使用色譜柱能有效的提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確率,很多朋友對(duì)于色譜柱的使用并不了解,那么色譜柱如何正確使用?下面就帶大家一起來了解一下。
色譜柱在使用前,最好進(jìn)行柱的性能測(cè)試,并將結(jié)果保存起來,作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同。
色譜柱的使用:
1、樣品的前處理:
a、最好使用流動(dòng)相溶解樣品。
b、使用予處理柱除去樣品中的強(qiáng)極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì)。
c、使用0.45μm的過濾膜過濾除去微粒雜質(zhì)。
2、流動(dòng)相的配制:
液相色譜是樣品組分在柱填料與流動(dòng)相之間質(zhì)量交換而達(dá)到分離的目的,因此要求流動(dòng)相具備以下的特點(diǎn):
a、流動(dòng)相對(duì)樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會(huì)沉淀在柱中(或長(zhǎng)時(shí)間保留在柱中)。
b、流動(dòng)相具有一定惰性,與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)(特殊情況除外)。
c、流動(dòng)相的黏度要盡量小,以便在使用較長(zhǎng)的分析柱時(shí)能得到好的分離效果;同時(shí)降低柱壓降,延長(zhǎng)液體泵的使用壽命(可運(yùn)用提高溫度的方法降低流動(dòng)相的黏度)。
d、流動(dòng)相的物化性質(zhì)要與使用的檢測(cè)器相適應(yīng)。如使用UV檢測(cè)器,最好使用對(duì)紫外吸收較低的溶劑配制。
e、流動(dòng)相沸點(diǎn)不要太低,否則容易產(chǎn)生氣泡,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)無法進(jìn)行。
f、在流動(dòng)相配制好后,一定要進(jìn)行脫氣。除去溶解在流動(dòng)相中的微量氣體既有利于檢測(cè),還可以防止流動(dòng)相中的微量氧與樣品發(fā)生作用。
3、流動(dòng)相流速的選擇:
因柱效是柱中流動(dòng)相線性流速的函數(shù),使用不同的流速可得到不同的柱效。對(duì)于一根特定的色譜柱,要追求最佳柱效,最好使用最佳流速。對(duì)內(nèi)徑為4.6mm的色譜柱,流速一般選擇1ml/min,對(duì)于內(nèi)徑為4.0mm柱,流速0.8ml/min為佳。當(dāng)選用最佳流速時(shí),分析時(shí)間可能延長(zhǎng)。可采用改變流動(dòng)相的洗滌強(qiáng)度的方法以縮短分析時(shí)間(如使用反相柱時(shí),可適當(dāng)增加甲醇或乙腈的含量)。
以上就是色譜柱的使用方法及使用時(shí)的注意事項(xiàng),我們一定要掌握好這些使用方法,這樣才能保證實(shí)驗(yàn)的正常進(jìn)行,同時(shí)避免實(shí)驗(yàn)資源的浪費(fèi)。如需繼續(xù)了解色譜柱相關(guān)消息或者更多相關(guān)資訊,歡迎閱讀《色譜柱如何做好維護(hù)工作,實(shí)驗(yàn)室儀器廠家教你色譜柱日常維護(hù)[行業(yè)熱點(diǎn)]》。
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